Study of ex-ovo embryonic development of Gallus gallus domesticus / Estudio inicial del desarrollo embrionario ex-ovo de Gallus gallus domesticus

SUMMARY: The domestic chicken is a species of bird that has been extensively studied in regard to its biology and as a model organism for science. The reproduction of the species is by the laying of fertilized eggs, which in a period of 21 days will develop a chick inside. Several methods have been described to develop embryos ex-ovo, allowing the observation and manipulation of the organism. This work has the propose to standardize a method that allows the development of the embryos inside the artificial incubation system, which has a low cost and is easy to make. In this work, 100 chicken eggs were used to study the effects of humidity, mineral supplementation, and the preincubation time of the egg on the incubation ex-ovo of the embryos. Embryo development was documented through the different days. Pulverized eggshell was selected as an optimal source to provide calcium, magnesium, phosphorus, and other minerals to the developing embryo. By providing 900-1200 mg of pulverized eggshell, 40 mL of the 0.001 % solution of benzalkonium chloride, and a preincubation time of approximately 56 h, the embryos were able to develop until 19 days, and even though they did not reach hatching, the incubation conditions that allowed the survival and development of embryos until late stages were achieved. Thus, due to the conditions established for calcium, humidity and preincubation time, in the present work, the chicks reached 19 days of development.

El pollo doméstico es una especie de ave que ha sido ampliamente estudiada en cuanto a su biología y como organismo modelo para la ciencia. La reproducción de la especie es por la puesta de huevos fecundados, que en un período de 21 días desarrollarán un polluelo en su interior. Se han descrito varios métodos para desarrollar embriones ex-ovo, permitiendo la observación y manipulación del organismo. Este trabajo tuvo como objetivo estandarizar un método que permita el desarrollo de los embriones dentro del sistema de incubación artificial, el cual tiene un bajo costo y es fácil de realizar. En este trabajo se utilizaron 100 huevos de gallina para estudiar los efectos de la humedad, la suplementación mineral y el tiempo de preincubación del huevo sobre la incubación ex-ovo de los embriones. El desarrollo embrionario se documentó a través de los diferentes días. Se seleccionó la cáscara de huevo pulverizada como una fuente óptima para proporcionar calcio, magnesio, fósforo y otros minerales al embrión en desarrollo. Al suministrar 900-1200 mg de cáscara de huevo pulverizada, 40 mL de la solución de cloruro de benzalconio al 0.001 % y un tiempo de preincubación de aproximadamente 56 h, los embriones lograron desarrollarse hasta los 19 días, y aunque no llegaron a eclosionar, los embriones lograron desarrollarse hasta los 19 días. Se lograron condiciones de incubación que permitieron la supervivencia y desarrollo de los embriones hasta etapas tardías. Así, debido a las condiciones establecidas de calcio, humedad y tiempo de preincubación, en el presente trabajo los pollitos alcanzaron los 19 días de desarrollo.

Expression of enamel proteins in rough endoplasmic reticulum and golgi complex in human dental germs / Expresión de proteínas del esmalte en retículo endoplásmico rugoso y complexo golgiensis en gérmenes dentales humanos

Tooth enamel is the hardest tissue in the body. The organic matrix configuration is provided by the main proteins amelogenin, ameloblastin and enamelysin (MMP20), an enzyme that helps to shape the matrix. The aim of this study was to determine by histochemistry the expression of amelogenin and enamelysin through the rough endoplasmic reticulum in the late stages of amelogenesis, and its expression in the Complexus golgiensis (Golgi complex / Golgi apparatus) in the early stages in human fetuses. In early stages a colocalization of both proteins inside the Golgi apparatus was found, being more evident the relationship between Golgi and amelogenin (99.92 %). In the late stage, a colocalization of both proteins and rugged endoplasmic reticulum was found. With enamelysin being more evident in relation with rough endoplasmic reticulum (99.95 %). Our findings demonstrated the presence of amelogenin and enamelysin in odontoblast and ameloblast. However, the presence of these two proteins in odontoblast remains unknown.

El esmalte dental es el tejido más duro del cuerpo. La configuración de la matriz orgánica es proporcionada por las proteínas principales amelogenina, ameloblastina y enamelisina (MMP20), una enzima que ayuda a dar forma a la matriz. El objetivo de este estudio fue determinar mediante histoquímica la expresión de amelogenina y enamelisina a través del retículo endoplasmático rugoso en las últimas etapas de la amelogénesis , y su expresión en el Complexo golgiensis en las primeras etapas de formación en fetos humanos. En las primeras etapas se observó colocalización de ambas proteínas en el interior del Complexo golgiensis, siendo más evidente la relación entre Golgi y amelogenina (99,92 %). En la última etapa, se identificó una colocalización de ambas proteínas y retículo endoplásmico rugoso. Resulto más evidente la enamelisina en relación con el retículo endoplasmático rugoso (99,95 %). Nuestros resultados demostraron la presencia de amelogenina y enamelisina en odontoblastos y ameloblastos, sin embargo se desconoce la presencia de estas dos proteínas en odontoblastos.

Expresión de tuftelina en gérmenes dentales humanos / Expression of tuftelin in human dental germs

La tuftelina es una proteína secretada en la matriz adamantina en desarrollo durante la formación del esmalte. Su función continúa sin esclarecerse, aunque se presume que juega un papel importante en la biomineralización de esmalte y dentina, así como en el desarrollo del órgano dental. Con el presente estudio se identificó su localización en las diferentes estructuras de gérmenes dentales de fetos humanos, conforme a los resultados se observó su expresión en el estadio pre-secretor observándose en el citoplasma de los ameloblastos, retículo estrellado, papila dental, así como en el estrato intermedio; en el secretor se identificó principalmente en la unión amelodentinaria, y en la superficie externa del esmalte, observando una marcada expresión de la proteína en la porción basal del proceso odontoblástico, pero no en la matriz extracelular de la dentina. De acuerdo a los resultados obtenidos se puede considerar que su expresión se presenta tanto en la amelogénesis, como en la odontogénesis en tejidos sin mineralizar.

The tuftelin is a secreted protein in the adamantine matrix in developing during the enamel formation. Its function continues unclarified, although it plays a role in the biomineralization of the dental organ. With the present studio the location was identified in the different structures of dental germs from human fetuses, according to the results it was observed the expression in the pre-secretor stage being observed in the cytoplasm of ameloblasts, stellate reticulum, dental papilla, also in the intermediate stratum; in the secretor it was mainly identified in the amelodentinal junction and in the outer surface of enamel, observing a marked expression of the protein in the basal portion of the odontoblastic process, but not in the extracellular matrix of the dentine. According to the results obtained it can be considered that its expression occurs in both amelogenesis and odontegenesis in unmineralized tissues.

Estudio morfométrico de la posición cráneo-cervical en pacientes con clases esqueletales II y III / Morphometric study of the skull-cervical position in patients with skeletal class II and III

La posición cráneo-cervical representa un factor importante en el diagnostico morfológico de discrepancias óseas, articulares y miofuncionales. En base a las diversas clases esqueletales se observan diferencias en la ubicación de puntos craneométricos que resultan determinantes en el diagnóstico del equilibrio ortostático del cráneo con la porción cervical de la columna vertebral. El objetivo de este estudio fue evaluar y comparar la posición cráneo-cervical en clases esqueletales II y III. Se recolectaron 114 radiografías laterales de cráneo, se analizaron y compararon los puntos craneométricos por medio de cefalometría con la Técnica de Rocabado. Los resultados muestran diferencias estadísticamente significativas en las posiciones craneales para cada clase esquelética tanto en distancias como rotación entre cráneo y porción cervical de la columna vertebral.

The skull-cervical position is an important factor in the morphological diagnosis of bone, joint and myofunctional discrepancies. Based on the various classes skeletal differences are observed in the locations that are critical points Craneometric diagnosis of orthostatic balance skull with the cervical portion of the spine. The aim of this study was to evaluate and compare Skull-cervical position in skeletal class II and III. Hundred fourteen lateral skull radiographs were collected, analyzed and compared the craniometric points through cephalometric with Rocabado technique. The results show a statistically significant difference in the positions for each skeletal cranial both class distances as rotation between the skull and cervical portion of the spine.